by Calreticulin-eksponering dikterer immunogeniciteten ved kræftcelledød
Anthracyclin-behandlede tumorceller er særligt effektive til fremkaldelse af et anticancerimmunrespons, hvorimod andre DNA-skadelige midler såsom etoposid og mitomycin C ikke inducerer immunogen celledød. Her viser vi, at anthracycliner inducerer hurtig, preapoptotisk translokation af calreticulin (CRT) til celleoverfladen. Blokade eller nedbrydning af CRT undertrykte fagocytose af anthracyclin-behandlede tumorceller af dendritiske celler og afskaffede deres immunogenicitet hos mus.
Den anthracyclin-inducerede CRT-translokation blev efterlignet ved inhibering af proteinphosphatase 1 / GADD34-komplekset. Administration af rekombinant CRT eller inhibitorer af proteinphosphatase 1 / GADD34 gendannede immunogeniciteten af celledød fremkaldt af etoposid og mitomycin C og forstærkede deres antitumoreffekter in vivo. Disse data identificerer CRT som et nøglefunktion, der bestemmer anticancerimmunresponser og afgrænser en mulig strategi for immunogen kemoterapi.
Endotel til mesenchymal overgang bidrager til hjertefibrose
Hjertefibrose, associeret med et nedsat omfang af mikrovaskulatur og med afbrydelse af normale myokardiale strukturer, skyldes overdreven aflejring af ekstracellulær matrix, som medieres ved rekruttering af fibroblaster. Kilden til disse fibroblaster er uklar, og specifikke anti-fibrotiske terapier er i øjeblikket ikke tilgængelige.
Her viser vi, at hjertefibrose er forbundet med fremkomsten af fibroblaster, der stammer fra endotelceller, hvilket tyder på en endotel-mesenkymal overgang (EndMT) svarende til begivenheder, der opstår under dannelsen af den atrioventrikulære pude i det embryonale hjerte. Transformerende vækstfaktor-beta1 (TGF-beta1) inducerede endotelceller til at gennemgå EndMT, mens knoglemorfogent protein 7 (BMP-7) bevarede endotelfænotypen.
Den systemiske administration af rekombinant human BMP-7 (rhBMP-7) inhiberede signifikant EndMT og progressionen af hjertefibrose i musemodeller af trykoverbelastning og kronisk afstødning af allotransplantat. Vores fund viser, at EndMT bidrager til progressionen af hjertefibrose, og at rhBMP-7 kan bruges til at hæmme EndMT og til at gribe ind i udviklingen af kronisk hjertesygdom forbundet med fibrose.
Et forbedret forbigående ekspressionssystem i planter baseret på undertrykkelse af gendæmpning af p19-proteinet af tomatbusket stuntvirus
Transient genekspression er en hurtig, fleksibel og reproducerbar tilgang til højniveauekspression af nyttige proteiner. I planter kan rekombinante stammer af Agrobacterium tumefaciens anvendes til forbigående ekspression af gener, der er blevet indsat i T-DNA-regionen i det bakterielle Ti-plasmid. En bakteriekultur vakuuminfiltreres i blade, og efter T-DNA-overførsel er der ektopisk ekspression af genet af interesse i plantecellerne.
Systemets anvendelighed er imidlertid begrænset, fordi ektopisk proteinekspression ophører efter 2-3 dage. Her viser vi, at post-transkriptionel gendæmpning (PTGS) er en væsentlig årsag til denne manglende effektivitet. Vi beskriver et system baseret på co-ekspression af en viral-kodet suppressor af gendæmpning, p19-proteinet af tomatbusket stuntvirus (TBSV), der forhindrer begyndelsen af PTGS i de infiltrerede væv og tillader højt niveau af forbigående ekspression.
Ekspression af en række proteiner blev forbedret 50 gange eller mere i nærværelse af p19, så proteinoprensning kunne opnås fra så lidt som 100 mg infiltreret bladmateriale. Virkningen af p19 var ikke mættet i celler, der havde modtaget op til fire individuelle T-DNA’er og vedvarende indtil bladets ældning.
På grund af sin enkelhed og hurtighed forventer vi, at det p19-forbedrede ekspressionssystem vil have værdi i industriel produktion samt et forskningsværktøj til isolering og biokemisk karakterisering af en bred vifte af proteiner uden behov for den tidskrævende regenerering af stabilt transformerede planter.
